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苯甲酸雌二醇暴露对小鼠睾丸组织的氧化损伤

【作者】 张瑞 任艳萍 陆祥 丁纺亚 雷小灿 陈伟

【关键词】 苯甲酸雌二醇 睾丸 氧化应激 细胞凋亡

摘要】目的 探讨外源性雌激素苯甲酸雌二醇(estradiol benzoate,EB)产生氧化应激诱导雄性小鼠的生精功能障碍.方法 将39只清洁级4周龄雄性昆明小鼠随机分为3组,分别为对照组(玉米油)和5、10 mg/kg EB染毒组,每组13只.采用肌肉注射方式进行染毒,染毒容量为5 μl/g,隔天1次,持续28 d.染毒结束后,每组随机选3只雄性小鼠按1∶2比例与雌性小鼠合笼,记录配对雌性小鼠受孕数和产仔数.采用流式细胞术检测睾丸细胞周期各时相细胞所占比例.睾丸组织匀浆,采用化学比色法检测睾丸组织内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)活力和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测睾丸组织SOD、CAT、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)及caspese-3、Bax mRNA表达水平,采用Western blot技术检测睾丸组织Caspese-3、Bax蛋白表达水平.结果 与对照组相比,各剂量EB染毒组小鼠睾丸组织G0/G1期和S期细胞所占比例均下降,而G2/M期细胞所占比例均升高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着EB染毒剂量的升高,小鼠睾丸G0/G1期和S期细胞所占比例均呈下降趋势,而G2/M期细胞所占比例呈上升趋势.与对照组相比,各剂量EB染毒组小鼠睾丸组织SOD、CAT、GSH-Px活力均降低,而NOS活力及MDA、NO含量均升高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着EB染毒剂量的升高,小鼠睾丸组织SOD、CAT、GSH-Px活力均呈下降趋势,而NOS活力及MDA、NO含量均呈上升趋势.与对照组相比,各剂量EB染毒组小鼠睾丸组织SOD、CAT、GPx4 mRNA的表达水平均降低,而Caspase-3蛋白和mRNA的表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着EB染毒剂量的升高,小鼠睾丸组织SOD、CAT、GPx4 mRNA的表达水平均呈下降趋势,而caspase-3、Bax蛋白和mRNA的表达水平均呈上升趋势.结论 EB可阻滞小鼠生精细胞周期,产生氧化损伤并上调caspase-3和Bax表达,这可能是EB引起雄性小鼠生精功能障碍的重要途径.

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